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老式分光光度計怎么用

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發(fā)表于 2024-11-9 10:11:13 | 只看該作者 |倒序瀏覽 |閱讀模式
老式分光光度計怎么用?
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    發(fā)表于 2024-11-9 11:10:19 | 只看該作者
    老式分光光度計(也叫分光光度計)是一種用于測量物質吸光度(或透過率)與波長關系的儀器,廣泛應用于化學分析、生物醫(yī)學等領域。分光光度計的原理基于比爾定律(Beer-Lambert Law),即物質吸收的光強度與其濃度和光路長度成正比。

    老式分光光度計通常由以下主要部分組成:

        光源:提供白光,通常使用氘燈、鎢燈等。
        單色儀(分光器):將白光分解成不同波長的單色光。
        樣品室:放置待測樣品。
        光電檢測器:檢測透過樣品的光,并轉化為電信號。
        顯示器/讀數裝置:顯示吸光度或透過率的數值。

    使用步驟:
    1. 準備樣品

        液體樣品:通常將樣品放在透明的比色管或光路容器中,確保容器潔凈且無氣泡。
        固體樣品:如果是固體,可能需要研磨成粉末或溶解在適當溶劑中,才能進行測量。

    2. 打開儀器

        打開分光光度計的電源,等待儀器預熱和穩(wěn)定。
        確保光源和單色儀已經正常工作。

    3. 選擇波長

        老式分光光度計上通常有一個旋鈕或控制按鈕用于設置波長。通過這個控制裝置,選擇你需要測量的波長(單位通常是納米,nm)。
        如果不確定最佳波長,可以根據待測物質的吸收光譜選擇最合適的波長。

    4. 校準儀器(空白對照)

        在測量之前,需要使用“空白對照”來進行校準??瞻讟悠肥侵覆缓郎y物質的溶液,通常是溶劑本身(例如水、緩沖液等)。
        將空白樣品放入比色管或樣品室,確保光路沒有任何障礙物。
        調整儀器,使其顯示0吸光度或100%透過率,這樣儀器就被“歸零”了,準備測量待測樣品。

    5. 測量樣品

        將待測樣品放入樣品室,確保光路通暢,樣品沒有氣泡。
        儀器會測量透過樣品的光的強度,并計算出樣品的吸光度(Absorbance, A)或透過率(Transmittance, T)。
            吸光度 (A) 通常是通過儀器顯示,數值越大表示樣品吸光度越強,反之則越弱。
            吸光度與透過率之間有關系:

            A=?log?T
            A=?logT

            T=10?A
            T=10?A
            其中,TT是透過率,AA是吸光度。

    6. 讀取結果

        儀器會顯示樣品在選定波長下的吸光度值,通常顯示的是一個數字,可能在顯示屏上顯示出來。
        對于定量分析,吸光度與樣品濃度是成正比的,可以通過比爾定律進行計算:

        A=εcl
        A=εcl
        其中,AA是吸光度,εε是摩爾吸光系數(物質特性,常常通過文獻查得),cc是樣品濃度,ll是光程(通常為比色管的長度)。

    7. 記錄數據

        根據吸光度和已知的摩爾吸光系數(如果需要),可以計算樣品的濃度。
        將結果記錄下來,并根據需要進行分析。
    生活不僅有眼前的茍且,還有遠方的枸杞
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    發(fā)表于 2024-11-9 11:24:22 | 只看該作者
    老式分光光度計使用步驟:開機預熱、調零、設定波長、放入樣品、讀取吸光度值。注意清潔比色皿,避免污染。
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